對樹莓栽種培養(yǎng)抗生素的研究論文
樹莓屬于薔薇科(Rosaceae)懸鉤子屬(RubusL。),是近幾年世界發(fā)展迅速的第三代新興水果。其鮮果含有多種人體必需的營養(yǎng)成分,并有較高的藥用價值;果實除鮮食外,還可制成果汁、果酒和清涼飲料,深受消費者的喜愛。樹莓推廣種植與產(chǎn)業(yè)化開發(fā)前景廣闊,但傳統(tǒng)的根蘗分株繁殖方法,難以滿足生產(chǎn)對大量優(yōu)質(zhì)苗木的需求。應(yīng)用組織培養(yǎng)繁育樹莓苗木可提高繁殖系數(shù)和苗木質(zhì)量。在植物組織培養(yǎng)過程中,控制外植體污染是組培發(fā)生的關(guān)鍵。本實驗探索了抑制樹莓外植體污染的有效途徑,為快繁技術(shù)研究奠定了基礎(chǔ)。
1實驗材料及方法
1。1實驗材料試驗樹莓品種為“費爾杜德”和“哈瑞太茲”,采用的外植體為腋芽。將采集的樹莓當(dāng)年生枝條去除葉片及葉柄部分,將枝條剪成帶1~2個腋芽的莖段,在流水狀態(tài)下沖洗10min。消毒程序:70%的酒精中浸30s→無菌水沖洗2~3次→0。1%HgCl2中浸泡→無菌水沖洗2~3次,接種到初生培養(yǎng)基上。試驗研究外植體在0。1%HgC:請記住我站域名l2溶液中的適宜消毒時間和培養(yǎng)基附加抗生素對外植體污染的影響。
1。2芽率(%)=萌芽外植體數(shù)/接種外植體數(shù)×100%污染率/%=污染外植體數(shù)/接種外植體數(shù)×100%芽生長狀態(tài)(包括葉色,長勢等)
2結(jié)果與分析
2。1外植體在0。1%HgCl2溶液中的適宜消毒時間試驗為了觀察外植體污染率初生培養(yǎng)基上未添加抗生素。從表1可以看出8、10、12min處理外植體污染率低;12min處理的萌芽率低,10min處理的萌芽率雖沒有降低,但是萌芽速度開始減慢。綜合比較,外植體在0。1%HgCl2溶液中消毒時間應(yīng)選8min為宜。
2。2培養(yǎng)基附加抗生素對外植體污染的影響從表2中看出初生培養(yǎng)基附加抗生素后有效地抑制了外植體污染。費爾杜德和哈瑞太茲分別加入60mg/L、80mg/L抗生素,萌芽率最高,污染率較低,芽生長良好。結(jié)合表1和表2得出雖然高濃度的.抗生素可有效地控制外植體污染,但是它會對芽萌發(fā)起到抑制作用,致使芽生長不健壯;相反低濃度的抗生素不能有效的抑制污染;適宜的抗生素濃度會對芽萌發(fā)起到促進作用,且不會對芽的生長造成不良影響。
3討論
和加衛(wèi)等[1]認(rèn)為未萌發(fā)的腋芽是樹莓快速繁殖的最佳外植體。樸日子等[2]認(rèn)為腋芽是無刺紅樹莓快繁的理想外植體,芽生長快,且遺傳性穩(wěn)定,莖尖易褐變死亡。本試驗選擇了帶腋芽的嫩枝莖段為外植體。帶腋芽的嫩枝莖段在田間易于取材,數(shù)量多,外層包裹的芽鱗片易于剝離,在生長培養(yǎng)基上啟動率高。目前對內(nèi)生菌防治的最有效辦法是使用抗生素[3]。研究表明:直接在培養(yǎng)基中加入抗生素能有效控制這類污染,然而這對培養(yǎng)材料也具有致毒作用并延緩其生長[4]。Leifert報道在培養(yǎng)基中加入抗生素結(jié)果使飛燕草的增殖和生根都受到阻緩[5]。本實驗在培養(yǎng)基中附加了抗生素,有效地抑制了外植體污染,但是高濃度的抗生素會抑制芽的萌發(fā),造成芽生長發(fā)育不良;抗生素對不同的品種影響不同,因此抗生素的選用也要因品種而異。4結(jié)論外植體在0。1%HgCl2溶液中消毒時間為8min。初生培養(yǎng)中費爾杜德和哈瑞太茲分別附加60mg/L、80mg/L抗生素,萌芽率最高,污染率較低,芽體萌發(fā)效果好。
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